Development of an ELISA system for detection of anti-Anaplasma marginale antibodies in cattle in Brazil.

An ELISA test was developed for detecting antibodies against Anaplasma marginale in bovine sera. Four antigenic preparations were produced from infected red blood cells. Some aliquots of this preparation were stored at -70 degrees C with 30% DMSO in phosphate-buffered saline (PBS) and others were lysed with 0.9% NH4Cl and stored at -20 degrees C. Typical anaplasmal structures were seen by electron microscopy in the antigenic preparations containing the erythrocytes that had been stored with DMSO. The performance of the ELISA test was evaluated by testing 298 positive serum samples collected from immunized cattle, 39 negative serum samples collected from cattle imported from areas free of A. marginale and 50 samples collected from cattle naturally infected in the field. The test gave a specificity of 94.87% and a sensitivity of 100%.

Comparaçäo entre ELISA e reaçäo de imunofluorescência indireta para detecçäo de anticorpos anti-Anaplasma marginale em bovinos / Comparision between ELISA and Indirect Fluorescent Antibody Test in the detection of antibodies against Anaplasma marginale in cattle

Um sistema ELISA foi comparado à reaçäo de imunofluorescência indireta (RIFI) na detecçäo de anticorpos anti-A. marginale em soros de bovinos. Utilizou-se um total de 337 amostras de soros, sendo 298 colhidas de bovinos importados, após terem sido submetidos ao processo de premuniçäo, e 39 amostras colhidas de animais importados, de áreas livres de hemoparasitas. O teste ELISA foi mais específico que a RIFI mostrando-se com potencial utilidade para estudos epidemiológicos da anaplasmose. Com os resultados obtidos determinou-se especificidade de 94,87 por cento e 71,79 por cento, sensibilidade de 100 por cento e 100 por cento, valor preditivo positivo 99,33 por cento e 96,44 por cento e valor preditivo negativo 100 por cento e 100 por cento para o ELISA e a RIFI, respectivamente

Curso da infecçäo por Anaplasma marginale (Theiler, 1910) em bovinos submetidos ao processo de premuniçäo para anaplasmose e babesiose / Course of infection by A. marginale in cattle submitted to premunization to anaplasmosis and babesiosis

O curso da infecçäo por Anaplasma marginale foi avaliado em 39 bovinos importados, da raça Limousin, de ambos os sexos, submetidos ao processo de premuniçäo para anaplasmose e babesiose, no Município de Capitólio (MG). Utilizou-se inóculo padronizado, constituído de sangue parasitado, obtido de animais sadios, criopreservado a -196§C. Os animais, divididos em cinco grupos, foram inoculados com sangue contendo 5x10 elevado à sexta potência Babesia spp ou infectados com larvas de Boophilus microplus provenientes de animais naturalmente infectados por Babesia spp e receberam inoculaçäo de 5x10 elevado à oitava potência hemácias parasitadas por Anaplasma marginale antes, simultaneamente ou 17 dias após a inoculaçäo de Babesia. Esfregaços sanguíneos diários, determinaçäo do volume globular semanal e da temperatura retal diária, pela manhä e à tarde, foram realizados para a verificaçäo do período prepatente, parasitemia e instituiçäo de tratamentos. Todos os animais foram desafiados em relaçäo ao A. marginale, 56 (grupos 3 e 5) e 73 dias (grupos 1, 2 e 4) após a inoculaçäo. O período prepatente médio variou de 19,8 a 26 dias, a parasitemia média no início do tratamento foi de 2,3 por cento e o número médio de tratamentos/animal variou de 3,2 a 4,4. O volume globular sofreu quedas após as fases de parasitemia de A. marginale, antes e após desafio. Durante a fase clínica da anaplasmose, as temperaturas retais apresentaram elevaçöes mais acentuadas no período da tarde. A inoculaçäo simultânea de Babesia spp e A. marginale, por razöes de manejo, parece ser o método mais prático de infecçäo para a realizaçäo do processo de premuniçäo

Avaliaçäo da resposta humoral para anaplasmose em bovinos submetidos à premuniçäo / Humoral response to anaplasmose in cattle submitted to premunition

Trinta e nove animais, de ambos os sexos, da raça Limousin, importados dos Estados Unidos, foram submetidos ao processo de premuniçäo, no Município de Capitólio (MG). Os animais, divididos em cinco grupos, foram inoculados com sangue contendo 5x10 elevado à oitava potência Babesia spp. ou infestados com larvas de Boophilus microplus, provenientes de animais naturalmente infectados por Babesia spp. e receberam inoculaçäo de 5x10 elevado à oitava potência Anaplasma marginale simultaneamente ou 17 dias após a inoculaçäo da Babesia. O perfil sorológico para A. marginale foi observado através de exames semanais pela reaçäo de imunofluorescência indireta. Todos os animais foram desafiados, em relaçäo ao A. marginale, 56 (grupos 3 e 5) e 73 (grupos 1, 2 e 4) dias após a inoculaçäo. Títulos máximos de anticorpos anti-A. marginale foram obtidos 49 dias após a inoculaçäo. Após o desafio os títulos foram crescentes até o 48§ dia